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均一化cDNA文库

均一化cDNA文库

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均一化cDNA文库

均一化cDNA文库是由WEISSMAN基于基因组DNA饱和杂交理论提出的生物技术概念,特指包含特定组织或细胞全部表达基因,且各基因对应cDNA拷贝数相近的文库。其核心目标是通过平衡不同转录本的丰度差异,解决传统文库中高表达基因占比过高导致低丰度基因丢失的问题。

20世纪后期研究发现,单个细胞中基因转录产物拷贝数差异可达数千倍,约75%基因处于中低表达水平。为解决此问题,学界提出两种均一化策略:其一利用高丰度cDNA复性速度快的特性,通过控制复性时间降低其比例;其二基于基因组DNA拷贝数均一性,采用cDNA-DNA饱和杂交结合PCR扩增等技术 。

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